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Anti-hnRNP K antibody [3C2] - ChIP Grade

抗hnRNP K抗體[3C2] - ChIP級

目錄號：IQ213

£226.00

目標抗原

hnRNP K. 

主要說明

小鼠抗hnRNP K [3C2] - ChIP等級

目錄編號

IQ213

數(shù)量

0.1毫升

濃度

1mg / ml的

克隆

3C2

主辦

老鼠 

同型

IgG2b的

免疫原

全長天然蛋白質(zhì)（純化的）（人類）

骨髓瘤/融合伴侶

SP2 / 0

物種反應(yīng)性

鼠標，大鼠，倉鼠，牛，人類，非洲爪蟾

純化

蛋白質(zhì)A.

格式

純化的抗體（來自上清液）含有PBS 0.1％;Sodium azide

應(yīng)用

WB，IP，ELISA，ICC / IF，流式細胞儀，ChIP /芯片，IHC（大鼠）

稀釋液

宜抗體稀釋應(yīng)通過滴定確定，但作為指導(dǎo)嘗試;

WB：1/1000。檢測到約65 kDa的條帶（預(yù)測分子量：51 kDa）

流式細胞：使用1μg106個細胞

ChIP /芯片：以分析依賴稀釋度使用。PubMed：20673990

參考

高R等人。異質(zhì)核核糖核蛋白K（hnRNP-K）通過誘導(dǎo)參與細胞外基質(zhì)，細胞運動和血管生成的基因來促進腫瘤轉(zhuǎn)移。J Biol Chem。2013年5月24日; 288（21）：15046-56。doi：10.1074 / jbc.M113.466136。Epub 2013年4月5日.ICC   / IF;  人類PMID：23564449

Marchand V等人。鑒定人免疫缺陷病毒1 tat / rev外顯子3的蛋白質(zhì)配偶體導(dǎo)致發(fā)現(xiàn)新的HIV-1剪接調(diào)節(jié)因子蛋白質(zhì)hnRNP K. RNA Biol。2011年3月至4月; 8（2）：325-42。Epub 2011年3月1日  IP WB; 人類PMID：21368586

Huarte M等。p53誘導(dǎo)的大型基因間非編碼RNA介導(dǎo)p53反應(yīng)中的全基因抑制。Cell 142：409-419（2010）。芯片/芯片; 鼠標 PMID：20673990

Chang JW等。hnRNP-K是TCR激活的ERK的核靶標，并且是T細胞晚期激活所必需的。Int Immunol。2009年12月; 21（12）：1351-61。doi：10.1093 / intimm / dxp106。Epub 2009年10月30日.WB; 人類PMID：19880579 

Enge M等人。p21和hnRNP K的MDM2依賴性下調(diào)提供了由藥理學(xué)活化的p53誘導(dǎo)的細胞凋亡和生長停滯之間的轉(zhuǎn)換。癌細胞。2009年3月3日; 15（3）：171-83。doi：10.1016 / j.ccr.2009.01.019。 WB ChIP; 人類 PMID：19249676

Fukuda T等。hnRNP K與RNA結(jié)合基序蛋白42相互作用，并在應(yīng)激條件下維持細胞ATP水平。基因細胞。2009年2月; 14（2）：113-28。doi：10.1111 / j.1365-2443.2008.01256.x。Epub 2008年1月6日  ICC / IF WB; 鼠標IP WB; 人類 PMID：19170760

Schulz M等人。外周血單核細胞的蛋白質(zhì)組學(xué)分析：在類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎患者中觀察到選擇性蛋白質(zhì)加工。J Proteome Res。2007年9月; 6（9）：3752-9。Epub 2007年8月17日  WB; 人類 PMID：17705417

Guil S等人。多功能RNA結(jié)合蛋白hnRNP A1是miR-18a加工所必需的。Nat Struct Mol Biol。2007年7月; 14（7）：591-6。Epub 2007年6月10日  WB; 人類  PMID：17558416 

Inoue A等。隨機細胞內(nèi)抗體的功能喪失篩查：鑒定hnRNP-K作為轉(zhuǎn)移的潛在靶標。Proc Natl Acad Sci US A. 2007 May 22; 104（21）：8983-8。Epub 2007年5月4日  WB; 人類 PMID：17483488

細胞類型特異性和發(fā)育調(diào)節(jié)異質(zhì)核核糖核蛋白K mRNA在大鼠神經(jīng)系統(tǒng)。Blanchette AR等。基因Expr模式。2006年8月; 6（6）：596-606。Epub 2006 Feb 20  PMID：16488668

格里菲斯BN等人。鑒定hnRNPs K，L和A2 / B1作為參與mRNA剪接的營養(yǎng)調(diào)節(jié)的候選蛋白。Biochim Biophys Acta。2006年11月至12月; 1759年（11-12）：552-61。Epub 2006年10月6日  WB; 鼠標 PMID：17095106 

Szeszel-Fedorowicz W等人。外顯子剪接沉默子參與葡萄糖-6-磷酸脫氫酶mRNA的調(diào)節(jié)剪接。J Biol Chem。2006年11月10日; 281（45）：34146-58。Epub 2006年9月15日  WB; 人類大鼠 PMID：16980303 

Blanchette AR等。細胞類型特異性和發(fā)育調(diào)節(jié)異質(zhì)核核糖核蛋白K mRNA在大鼠神經(jīng)系統(tǒng)。基因Expr模式。2006年8月; 6（6）：596-606。Epub 2006年2月20日  .IHC; 大鼠 PMID：16488668 

Yano M等人。通過p21 mRNA轉(zhuǎn)錄后調(diào)控，參與Hu和異質(zhì)核核糖核蛋白K在神經(jīng)元分化中的作用。J Biol Chem。2005年4月1日; 280（13）：12690-9。Epub 2005年1月25日  WB; 鼠標 PMID：15671036

聚（C）結(jié)合異構(gòu)核核糖核蛋白復(fù)合物K蛋白的表征和一級結(jié)構(gòu)。Matunis M（Cell.Biol，1992年1月）  PMID：1729596

數(shù)據(jù)庫鏈接

Entrez Gene：528135牛

Entrez Gene：3190 Human

Entrez基因：15387鼠標

Entrez基因：117282大鼠

Omim：600712人類

SwissProt：Q3T0D0牛

SwissProt：P61978人類

SwissProt：P61979鼠標

SwissProt：P61980大鼠

Unigene：522257人類

Unigene：142872鼠標

Unigene：11854鼠

研究領(lǐng)域

染色質(zhì); RNA結(jié)合;

也稱為

CSBP抗體; dC拉伸結(jié)合蛋白抗體; FLJ41122抗體;異種核核糖核蛋白K抗體; hnRNP K抗體; HNRNPK抗體; HNRPK抗體; HNRPK_HUMAN抗體;轉(zhuǎn)化上調(diào)核抗體;轉(zhuǎn)化上調(diào)核蛋白抗體;轉(zhuǎn)化上調(diào)核蛋白抗體;轉(zhuǎn)化上調(diào)的核蛋白抗體; TUNP抗體

本產(chǎn)品僅供研究使用。不用于治療或診斷用途。

異質(zhì)核RNA（hnRNA）的微粒復(fù)合物是高Mr的RNA分子的異質(zhì)混合物，其在蛋白質(zhì)合成過程中在細胞核中發(fā)生，具有細胞特異性和異質(zhì)性的蛋白質(zhì)。蛋白質(zhì)組分可能在加工過程中起作用。 hnRNA對mRNA的影響

免疫熒光方案 - 甲醛固定

   1.從Tcunit收集細胞，并用吸力從培養(yǎng)皿中取出培養(yǎng)基。
   2.用1x PBS洗滌并取出。
   3.在室溫下在軌道振蕩器上將細胞在預(yù)熱（37℃）對甲醛中孵育12分鐘。
   4.去除PFA并在室溫下在1x PBS中的0.5％Triton X-100中孵育5分鐘。
   5.準備封閉試劑，這也是抗體稀釋劑。
   6.在室溫下用1x PBS洗滌細胞2次，在軌道振蕩器上洗滌4分鐘/洗滌。
   7.在室溫下用1％NCS和1x PBS封閉30分鐘。
   8.準備一抗（50μl/蓋玻片）和濕潤染色室。
   9.在室溫下用1x PBS洗滌細胞2次并短暫風(fēng)干。
  10.在室溫下在黑暗的染色室中與一抗孵育1小時。在此期間準備二抗。
  11.用1x PBS洗滌細胞5次（每個燒杯更換5個燒杯/ 5個計數(shù)）
  12。在室溫下在黑暗的染色室中與第二抗體孵育1小時。
  13.用1x PBS洗滌細胞5次。
  14.登上達皮。

溶液（染色當天新鮮制備）。

    * 1x磷酸鹽緩沖鹽水。
    *封閉試劑：1x PBS中1％NCS（使用新鮮的10x PBS）。
    *固定液：3.5％對甲醛。

1.75g PFA在20ml d.H2O中加5滴1M NaOH。在50-60℃的熱板上攪拌直至溶解。加入4滴IN HCl并檢查pH指示條。PH值應(yīng)為7.4。完成體積，d.H20至25ml，加入25ml 2xPBS。在添加到蓋玻片之前檢查pH值。


免疫熒光方案 - 甲醇/丙酮固定

   1.從TCunit收集細胞，并用吸力從培養(yǎng)皿中取出培養(yǎng)基。
   2.用1x PBS洗滌并取出。
   3.用冷甲醇：丙酮1：1在冰上固定細胞10分鐘。
   4.制備阻斷試劑，這也是抗體的稀釋劑。
   5.取出固定劑并在室溫下用1x PBS洗滌細胞3次，在軌道振蕩器上洗滌4分鐘。
   6.在室溫下用1％NCS和1x PBS封閉30分鐘。
   7.準備一抗（50？l /蓋玻片）和濕染色室。
   8.在室溫下用1x PBS洗滌細胞2次并風(fēng)干約7分鐘。
   9.在室溫下在室溫下與一抗孵育1小時，在染色室中避光。在此期間準備二抗。
  10.用1x PBS洗滌細胞5次（每個燒杯更換5次燒杯/ 5次計數(shù)）
  11。在室溫下，在染色室的黑暗中與第二抗體孵育1小時。
  12.用1x PBS洗滌細胞5次。
  13.登上達皮。

溶液（染色當天新鮮制備）

    * 1x磷酸鹽緩沖鹽水。
    *封閉試劑：1x PBS中1％NCS（使用新鮮的10x PBS）。
    *固定液：甲醇：丙酮1：1冰冷。



Western Blotting Protocol

   1.將凝膠轉(zhuǎn)移到PDVF或硝酸纖維素膜上
   2.將膜置于封閉緩沖液中的塑料托盤中攪拌1小時
   3.在洗滌緩沖液中沖洗
   4.在洗滌緩沖液和一抗中孵育1小時
   5.洗滌6次X用洗滌緩沖液洗滌5分鐘
   6.在洗滌緩沖液和二抗中孵育1小時
   7.用洗滌緩沖液洗滌6X 5分鐘
   8.檢測（例如ECL，Amersham根據(jù)制造商的說明）

洗滌緩沖液
PBS + 0.1％Tween 20 

阻斷緩沖液
洗滌緩沖液+ 5％奶粉

所用抗體的濃度取決于每種抗體，抗原的量和所用的檢測方法。通常，稀釋在稀釋的幾百倍稀釋到幾千倍的范圍內(nèi)，但通常必須憑經(jīng)驗確定。

研究領(lǐng)域
染色質(zhì)RNA結(jié)合
研究
表征聚（C）結(jié)合異質(zhì)核核糖核蛋白復(fù)合物K蛋白的基本結(jié)構(gòu) - Matunis M通過p21 mRNA轉(zhuǎn)錄調(diào)控參與Hu和異質(zhì)核核糖核蛋白K在神經(jīng)元分化中的作用 - Masato Yano等