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proteos哺乳動(dòng)物細(xì)胞表達(dá)

更新時(shí)間:2020-12-03      點(diǎn)擊次數(shù):1887

 

全長(zhǎng)IgG抗體,F(xiàn)(ab)和(Fab')2抗體片段以及抗體融合蛋白的表達(dá)和純化。我們的抗體生產(chǎn)能力包括構(gòu)建體設(shè)計(jì),瞬時(shí)哺乳動(dòng)物細(xì)胞表達(dá),利用內(nèi)部或客戶(hù)提供的表達(dá)載體以及親和純化。我們提供分子和酶促方法來(lái)生成F(ab)和(Fab')2抗體片段。

 

抗體生產(chǎn)

通過(guò)SDS-PAGE進(jìn)行蛋白A純化的IgG分析

Proteos提供全長(zhǎng)IgG抗體,F(xiàn)(ab)和(Fab')2抗體片段以及抗體融合蛋白的生產(chǎn)。我們的抗體生產(chǎn)能力包括構(gòu)建體設(shè)計(jì),利用內(nèi)部或客戶(hù)提供的表達(dá)載體進(jìn)行瞬時(shí)哺乳動(dòng)物細(xì)胞表達(dá)以及親和純化。提供的其他純化服務(wù)包括在一次生產(chǎn)運(yùn)行中多10克抗體的尺寸排阻色譜,通過(guò)透析進(jìn)行的緩沖液交換,內(nèi)毒素測(cè)試,分析SEC和SDS-PAGE(還原和非還原)。

我們行業(yè)的瞬態(tài)表達(dá)平臺(tái)利用表達(dá)Epstein-Barr病毒(EBV)核抗原1的*授權(quán)的HEK(人類(lèi)倉(cāng)鼠卵巢)和CHO(中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢)細(xì)胞系,以及包含EBV復(fù)制起點(diǎn)(OriP)的專(zhuān)有表達(dá)載體允許游離質(zhì)粒擴(kuò)增和高水平重組蛋白表達(dá)。

我們還提供細(xì)胞系擴(kuò)增,冷凍保存和客戶(hù)提供的細(xì)胞系庫(kù)。總庫(kù)將專(zhuān)門(mén)為客戶(hù)的瞬時(shí)或穩(wěn)定蛋白質(zhì)生產(chǎn)項(xiàng)目而維護(hù),并將根據(jù)其要求銷(xiāo)毀或退還。

我們利用經(jīng)過(guò)優(yōu)化和經(jīng)過(guò)充分驗(yàn)證的哺乳動(dòng)物細(xì)胞表達(dá)方案,在無(wú)血清搖瓶培養(yǎng)體積為30 mL至60 L批次大小的情況下獲得一致,可再現(xiàn)的蛋白表達(dá)。僅無(wú)支原體,高存活率,低傳代培養(yǎng)用于轉(zhuǎn)染,并使用Beckman Coulter Vi-cell XR監(jiān)測(cè)培養(yǎng)密度,存活率和平均細(xì)胞直徑。Vi-cell XR使用錐蟲(chóng)藍(lán)染料排除方法,平均50次測(cè)量結(jié)果以計(jì)算每個(gè)樣品的參數(shù)。這使我們能夠高度準(zhǔn)確地監(jiān)測(cè)培養(yǎng),這對(duì)于蛋白質(zhì)生產(chǎn)項(xiàng)目的質(zhì)量和可重復(fù)性至關(guān)重要。每個(gè)項(xiàng)目隨附的定制技術(shù)報(bào)告中均包含所有細(xì)胞培養(yǎng)數(shù)據(jù)。

從構(gòu)建體設(shè)計(jì)開(kāi)始,抗體生產(chǎn)的典型生產(chǎn)時(shí)間為6-8周。  

全面的生產(chǎn)服務(wù):

  • 全套分子生物學(xué)服務(wù)可與我們的任何表達(dá)平臺(tái)一起提供,包括構(gòu)建體設(shè)計(jì),融合伴侶和親和標(biāo)簽選擇,帶有密碼子優(yōu)化的基因合成,亞克隆,無(wú)內(nèi)毒素質(zhì)粒DNA分離和序列驗(yàn)證。
  • 在小于100 mL的培養(yǎng)規(guī)模上進(jìn)行表達(dá)驗(yàn)證和優(yōu)化;非常適合并行表達(dá)測(cè)試多種抗體。
  • 以30毫升的培養(yǎng)規(guī)模平行生產(chǎn)8組抗體的中等通量生產(chǎn)。多可以并行生產(chǎn)48個(gè)抗體。
  • 在1 L至4 L的培養(yǎng)規(guī)模上進(jìn)行中試規(guī)模生產(chǎn)和產(chǎn)量測(cè)定;大規(guī)模生產(chǎn)之前通過(guò)純化進(jìn)行過(guò)程驗(yàn)證的理想選擇。
  • 在搖瓶培養(yǎng)體積不超過(guò)60 L的HEK或CHO細(xì)胞中制備規(guī)模的重組全長(zhǎng)IgG,抗體片段或抗體融合蛋白。
  • 抗體表達(dá)服務(wù)可以與Proteos的純化服務(wù)結(jié)合使用,以實(shí)現(xiàn)*定制的蛋白質(zhì)生產(chǎn)過(guò)程。

其他抗體服務(wù):

  • 酶促處理全長(zhǎng)IgG以生產(chǎn)F(ab)或F(ab')2抗體片段
  • 從血清,腹水或其他BSL-1生物體液中純化IgG
  • 抗體同型測(cè)定
  • 抗體標(biāo)記(HRP,生物素,F(xiàn)ITC等)
  • 抗原產(chǎn)生 

proteos哺乳動(dòng)物細(xì)胞表達(dá)

Proteos可在哺乳動(dòng)物細(xì)胞中表達(dá)重組蛋白和抗體,包括適當(dāng)?shù)姆g后修飾。這些翻譯后修飾通常是有效分泌和功能所必需的,這就是為什么在需要生物功能蛋白的情況下,優(yōu)選哺乳動(dòng)物細(xì)胞生產(chǎn)的原因。

我們行業(yè)的瞬態(tài)表達(dá)平臺(tái)利用表達(dá)Epstein-Barr病毒(EBV)核抗原1的*授權(quán)的HEK(人類(lèi)倉(cāng)鼠卵巢)和CHO(中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢)細(xì)胞系,以及包含EBV復(fù)制起點(diǎn)(OriP)的專(zhuān)有表達(dá)載體允許游離質(zhì)粒擴(kuò)增和高水平重組蛋白表達(dá)。

我們還可以在客戶(hù)提供的細(xì)胞系中提供細(xì)胞系擴(kuò)增,儲(chǔ)存和瞬時(shí)表達(dá)。

我們經(jīng)過(guò)優(yōu)化和充分驗(yàn)證的哺乳動(dòng)物細(xì)胞表達(dá)方案可在無(wú)血清搖瓶培養(yǎng)體積為每批30 mL至60 L的范圍內(nèi)提供一致,可再現(xiàn)的蛋白質(zhì)表達(dá)。僅使用無(wú)支原體,高存活率,低傳代培養(yǎng)物進(jìn)行轉(zhuǎn)染,并使用Beckman Coulter Vi-CELL XR監(jiān)測(cè)其培養(yǎng)物密度,存活率和平均細(xì)胞直徑。Vi-CELL XR使用錐蟲(chóng)藍(lán)染料排除方法,平均50次測(cè)量值以計(jì)算每個(gè)樣品的參數(shù)。這使我們能夠高度準(zhǔn)確地監(jiān)測(cè)培養(yǎng),這對(duì)于蛋白質(zhì)生產(chǎn)項(xiàng)目的質(zhì)量和可重復(fù)性至關(guān)重要。每個(gè)項(xiàng)目隨附的定制技術(shù)報(bào)告中均包含所有細(xì)胞培養(yǎng)數(shù)據(jù)。

從構(gòu)建體設(shè)計(jì)到純化的蛋白質(zhì),典型的生產(chǎn)時(shí)間為6-8周。

服務(wù)包括:

  • 全套分子生物學(xué)服務(wù)可與我們的任何表達(dá)平臺(tái)一起提供,包括構(gòu)建體設(shè)計(jì),融合伴侶和親和標(biāo)簽選擇,帶有密碼子優(yōu)化的基因合成,亞克隆,無(wú)內(nèi)毒素質(zhì)粒DNA分離和序列驗(yàn)證。
  • 在小于100 mL的培養(yǎng)規(guī)模上進(jìn)行表達(dá)驗(yàn)證和優(yōu)化;并行測(cè)試多個(gè)重組蛋白靶標(biāo)的理想選擇。
  • 在1 L至4 L的培養(yǎng)規(guī)模上進(jìn)行中試規(guī)模生產(chǎn)和產(chǎn)量測(cè)定;大規(guī)模生產(chǎn)之前通過(guò)純化進(jìn)行過(guò)程驗(yàn)證的理想選擇。
  • 在搖瓶培養(yǎng)物中,HEK或CHO細(xì)胞中重組蛋白的制備規(guī)模生產(chǎn),批量大可達(dá)到60L。
  • 交付選項(xiàng)包括細(xì)胞糊劑,條件培養(yǎng)上清液,濃縮緩沖液交換的培養(yǎng)上清液或膜制劑。
  • 哺乳動(dòng)物細(xì)胞表達(dá)服務(wù)可以與Proteos的純化服務(wù)結(jié)合使用,以實(shí)現(xiàn)*定制的蛋白質(zhì)生產(chǎn)過(guò)程。

 

 

 

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